细胞培养一般方法

细胞培养一般方法为http://www.guanggao6.com整理发布，类型为高一生物，本站还有更多关于高一生物课本-基础知识-教案，高中学习 - 高中生物 - 高一生物的文章。
正文：

细胞培养一般方法

1.玻璃吸管和玻璃培养瓶的消毒:1)高压蒸汽灭菌15分钟以上;2)干烤消毒140度2小时以上;

2.无菌工作台先清洗后用75%酒精擦拭干净,紫外线照射40分钟以上;各种培养板照射3小时以上;

3.培养基(pH7.2)和血清配制好后要做无菌试验:将血清按10%加入培养基内,用无菌的玻璃离心管或玻璃瓶取完全培养基5-10ml置培养箱内培养2-3天,肉眼见无浑浊或沉淀等异物.分装后置-20度保存;

4.消化液(pH7.8)或其它加入液,应用高压蒸汽灭菌或一次性无菌滤器过滤除菌,分装成支置-20度保存;

5.各种炒娴囊禾甯次率庇Ρ咭”呷诨?否则有的液体(特别是培养基)容易产生沉淀.

6.培养箱应先用清水清洗后用75%酒精擦拭一遍(如有紫外线的应照射1小时以上,如有高温灭菌的应按程序来菌).至少每月一次.

7.进入操作时应注意先清洗双手及手腕,然后用75%酒精擦拭,操作时注意无菌台内空间层次.手及物品不要在暴露的瓶口上方来往,如果数量较多,培养瓶应放在与酒精灯平行地方便于操作,瓶与瓶之间应相隔一定的距离,开瓶(盖)时应先用75%酒精反复擦拭或用灯烧,开开后应用灯先烧口,然后烧盖.用完后同样操作.整个操作过程尽量在无菌台靠里面一点.

复苏:

1.应遵守慢冻快融的原则.先将水温锅调至37-37.5度,取出冻存的细胞迅速放入后交细胞面浸至水面以下不断摇动至融化.

2.在无菌台内将完全培养基加入50ml的小培养瓶内,约5ml左右,然后用无菌吸管从冻存管内取出细胞,置培养并内轻轻摇晃,使细胞均匀后置培养箱内培养.

传代:

1.贴壁细胞:

对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基,吸的越干净越好,以免中和后加入的消化液,使强度减弱.50ml培养瓶加入消化液约0.6ml,按此比例进行消化, (根据配制强度经验),晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2分钟,镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后,轻轻振动瓶底使细胞全部脱落,加入2-3ml完全培养基后,轻轻吹打,使细胞基本成单个悬浮,然后分置其它无菌培养瓶内,加入完全培养基后继续培养或实验.

2.悬浮细胞:

一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内,加入完全培养基继续培养,如要高浓度可先离心500rpm,5min后加入完全培养基,轻轻吹匀后,分置其它培养瓶内加入完全培养基继续培养.

编辑推荐：

高中生物学习的九种方法

高中生物学是一门基础学科，其中的知识并不深奥，但是往往有许多学生因为学习方法不当，耗费了大量的时间和精力，还是入不了门。这里有几种实用的学习生物的方法供同学们参考。

1.仔细了解课本内容，理解和记忆基本概念。

1)根据每单元的学习目标，联系各个概念进行学习。

2)不要只记忆核心事项，要一步一步进行深入的学习。

3)要正确把握课本上的图像、表格、相片所表示的意思。

2.把所学的内容跟实际生活联系起来理解。

3.把日常用语和科学用语互做比较，确实理解整理后再记忆。

4.把内容用图或表格表述后，再进行整理和理解。

高一生物：从生物圈到细胞

一、任何生物的生命活动都离不开细胞

1.病毒的生命活动离不开细胞

⑴病毒_________细胞结构，只能营______生活，只有在 内才具有生命现象。根据宿主不同，病毒可分为______病毒(如烟草花叶病毒)、______病毒(如鸡瘟病毒)、______病毒(噬菌体)。

⑶SARS病毒破坏人的 等处的细胞;乙肝病毒破坏___细胞;脊髓灰质炎病毒破坏____________，导致小儿麻痹症;HIV破坏 ，使人丧失免疫力。

如果觉得《细胞培养一般方法》不错，可以推荐给好友哦。